Avaliação química de polissacarídeos e propriedades antimelanoma da heterogalactana proveniente do macrofungo Hypsizygus marmoreus

dc.contributor.advisor1Carbonero, Elaine Rosechrer
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/7136817335979894eng
dc.contributor.referee1Carbonero, Elaine Rosecher
dc.contributor.referee2Freitas, Lorena Ramos de
dc.contributor.referee3Leal, Maria Carolina Di-Medeiros
dc.creatorOliveira, Ruberney da Silva de
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9310393838290178eng
dc.date.accessioned2019-03-18T12:41:51Z
dc.date.accessioned2022-04-26T13:42:43Z
dc.date.available2022-04-26T13:42:43Z
dc.date.issued2019-02-02
dc.description.abstractHypsizygus marmoreus, popularly known as "Bunashimeji" in Japan, is an edible mushroom highly valued for its medicinal properties. Several therapeutic effects have been reported for this species as immunomodulatory, antitumor, antiviral, cytotoxic, antifungal, antihypertensive, antioxidant, anti-inflammatory, antiproliferative, regulation of obesity and insulin resistance, antiatherosclerotic, which have been attributed to crude extracts, fractions and/or isolated compounds (proteins, lipids, polysaccharides, oligopeptides and secondary metabolites) obtained from the basidiocarp and/or mycelium and filtered from the submerged culture. Considering the diversity of polysaccharides present in each fungal species, as well as their importance in modifying the biological response, the H. marmoreus mushroom is unexplored in this area, representing an important species to be studied. For this, the aqueous and alkaline extractions were performed to obtain the polysaccharide extracts, which were purified by freezing/thawing and precipitation with Fehling's solution. The structural determination was performed by NMR spectroscopy, monosaccharide composition analysis and methylation by GC-MS and partial hydrolysis. From the cold aqueous extract was isolated a fucomannogalactan (fraction Hm-PF2AF, Hm-FMG; Mw = 17,670 Da) contained (-16)-linked galactopyranosyl main chain, partially substituted at O-2 with non-reducing ends of α-L-Fucp and -Manp; a branched α-glucan with glycosidic bonds of the type (1→4) and (1→6) (Hm-MRSF2) with a glycogen-like structure and a branched -glucan with a Glcp-(1→3)-linked backbone, partially substituted at O-6 by non-reducing ends of -Glcp (Hm-S2AF). Fractionation of the cold water soluble fraction obtained from the alkaline extract (Hm-SK) resulted in two fractions containing glycogen and a -glucan (Hm-SFK and Hm-PFK) distinct from that previously mentioned. After elimination of glycogen by amylase treatment, the fractions obtained (Hm-TASFK and Hm-TAPFK, respectively) probably consist of branched -glucans containing a main chain of β-Glcp (16)-linked, which are partially substituted in O-3. Further analysis of structural characterization (2D NMR, methylation, partial degradation of Smith, among others) should be performed to confirm the structure of -glucans isolated and other fractions obtained in this study. In order to prove the effects of polysaccharides as biological response modifiers, the purified fractions (fucomannogalactan and -glucans) of H. marmoreus were submitted to evaluation of the antitumoral activities, in collaboration with Prof. Dr. Edvaldo da Silva Trindade and Dr. Stellee M. P. Biscaia from the Cell Biology Department of the Federal University of Paraná. Preliminary results of fucomannogalactan (Hm-FMG) demonstrated that heterogalactan was not cytotoxic, nor altered cell morphology, but was able to reprogram B16-F10 murine melanoma cells by modifying colony formation ability and cell migration, without changing cellular proliferation. In view of the promising in vitro antimelanoma effects of the Hm-FMG polysaccharide, it can be suggested that these polymers are responsible for part of the therapeutic properties conferred by this macrofungus. To confirm these findings, additional assays should be performed to prove the possible antitumor effects of purified fractions and the mechanism of action of these compounds.eng
dc.description.resumoHypsizygus marmoreus, conhecido popularmente no Japão como “Bunashimeji”, é um cogumelo comestível altamente valorizado pelas suas propriedades medicinais. Diversos efeitos terapêuticos foram reportados para esta espécie tais como: imunomodulatório, antitumoral, antiviral, citotóxico, antifúngico, anti-hipertensivo, antioxidante, anti-inflamatório, antiproliferativo, regulação da obesidade e da resistência à insulina, antiaterosclerótico, os quais têm sido atribuídos aos extratos brutos, frações e/ou compostos isolados (proteínas, lipídeos, polissacarídeos, oligopeptídeo e metabólitos secundário), obtidos dos basidiomas e/ou do micélio e filtrado provenientes do cultivo submerso. Tendo em vista a diversidade de polissacarídeos presentes em cada espécie fúngica, bem como a sua importância na modificação da resposta biológica, o cogumelo H. marmoreus encontra-se inexplorado nesta área, representando uma espécie importante a ser estudada. Para isto, foram realizadas as extrações aquosas e alcalinas para obter os extratos polissacarídicos, os quais foram purificados por congelamento/degelo e precipitação com solução de Fehling. A determinação estrutural foi realizada por espectroscopia de RMN, análise de composição monossacarídica e metilação por CG-EM e hidrólise parcial. A partir do extrato aquoso a frio foi isolado uma fucomanogalactana (fração Hm-PF2AF, Hm-FMG; Mw = 17.670 Da) composta por uma cadeia principal de α-D-Galp ligada (1→6), parcialmente substituída em O-2 por terminais não redutores de α-L-Fucp e -Manp; uma α-glucana ramificada com ligações glicosídicas do tipo (1→4) e (1→6) (Hm-MRSF2) com estrutura similar ao glicogênio e uma -glucana ramificada, com cadeia principal de Glcp ligada em (1→3), substituída parcialmente em O-6 por terminais não redutores de -Glcp (Hm-S2AF). O fracionamento da fração solúvel em água fria obtida do extrato alcalino (Hm-SK) resultou em duas frações contendo glicogênio e uma -glucana (Hm-SFK e Hm-PFK) distinta da citada anteriormente. Após eliminação do glicogênio por tratamento com amilase, as frações obtidas (Hm-TASFK e Hm-TAPFK, respectivamente) consistem, provavelmente, em -glucanas ramificadas contendo uma cadeia principal constituída por β-Glcp ligadas (16), as quais se apresentam parcialmente substituídas em O-3. Análises adicionais de caracterização estrutural (RMN 2D, metilação, degradação parcial de Smith, entre outras) deverão ser realizadas para confirmar a estrutura das -glucanas isoladas e das demais frações obtidas neste estudo. Com a finalidade de comprovar os efeitos dos polissacarídeos como modificadores de resposta biológica, as frações purificadas (fucomanogalactana e -glucanas) de H. marmoreus foram enviadas para avaliação da atividade, em colaboração com o Prof. Dr. Edvaldo da Silva Trindade e Dra. Stellee M. P. Biscaia do Departamento de Biologia Celular da Universidade Federal do Paraná. Resultados preliminares da fucomanogalactana (Hm-FMG) demonstraram que a heterogalactana não foi citotóxica, nem alterou a morfologia celular, mas foi capaz de reprogramar as células de melanoma murino B16-F10, modificando a capacidade de formação de colônias e a migração celular, sem alterar a proliferação celular. Diante dos promissores efeitos antimelanoma in vitro do polissacarídeo Hm-FMG, pode-se sugerir que estes polímeros são responsáveis por parte das propriedades terapêuticas conferidas por este macrofungo. Para comprovar estes achados, ensaios adicionais deverão ser realizados para comprovar a possível ação antitumoral das demais frações purificadas, bem como o mecanismo de ação destes compostos.eng
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationOLIVEIRA, R. S. Avaliação química de polissacarídeos e propriedades antimelanoma da heterogalactana proveniente do macrofungo Hypsizygus marmoreus. 2019. 100 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal de Goiás, Catalão, 2019.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufcat.edu.br/tede/handle/tede/9338
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentRegional Catalão (RC)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Química (RC)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectHypsizygus marmoreuspor
dc.subjectMacrofungospor
dc.subjectPolissacarídeospor
dc.subjectCaracterização estruturalpor
dc.subjectAtividade antitumoralpor
dc.subjectMacrofungieng
dc.subjectPolysaccharideseng
dc.subjectStructural characterizationeng
dc.subjectAntitumor activityeng
dc.subject.cnpqCIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICAeng
dc.titleAvaliação química de polissacarídeos e propriedades antimelanoma da heterogalactana proveniente do macrofungo Hypsizygus marmoreuseng
dc.typeDissertaçãoeng

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