Avaliação química de polissacarídeos e propriedades antimelanoma da heterogalactana proveniente do macrofungo Hypsizygus marmoreus

Abstract

Hypsizygus marmoreus, conhecido popularmente no Japão como “Bunashimeji”, é um cogumelo comestível altamente valorizado pelas suas propriedades medicinais. Diversos efeitos terapêuticos foram reportados para esta espécie tais como: imunomodulatório, antitumoral, antiviral, citotóxico, antifúngico, anti-hipertensivo, antioxidante, anti-inflamatório, antiproliferativo, regulação da obesidade e da resistência à insulina, antiaterosclerótico, os quais têm sido atribuídos aos extratos brutos, frações e/ou compostos isolados (proteínas, lipídeos, polissacarídeos, oligopeptídeo e metabólitos secundário), obtidos dos basidiomas e/ou do micélio e filtrado provenientes do cultivo submerso. Tendo em vista a diversidade de polissacarídeos presentes em cada espécie fúngica, bem como a sua importância na modificação da resposta biológica, o cogumelo H. marmoreus encontra-se inexplorado nesta área, representando uma espécie importante a ser estudada. Para isto, foram realizadas as extrações aquosas e alcalinas para obter os extratos polissacarídicos, os quais foram purificados por congelamento/degelo e precipitação com solução de Fehling. A determinação estrutural foi realizada por espectroscopia de RMN, análise de composição monossacarídica e metilação por CG-EM e hidrólise parcial. A partir do extrato aquoso a frio foi isolado uma fucomanogalactana (fração Hm-PF2AF, Hm-FMG; Mw = 17.670 Da) composta por uma cadeia principal de α-D-Galp ligada (1→6), parcialmente substituída em O-2 por terminais não redutores de α-L-Fucp e -Manp; uma α-glucana ramificada com ligações glicosídicas do tipo (1→4) e (1→6) (Hm-MRSF2) com estrutura similar ao glicogênio e uma -glucana ramificada, com cadeia principal de Glcp ligada em (1→3), substituída parcialmente em O-6 por terminais não redutores de -Glcp (Hm-S2AF). O fracionamento da fração solúvel em água fria obtida do extrato alcalino (Hm-SK) resultou em duas frações contendo glicogênio e uma -glucana (Hm-SFK e Hm-PFK) distinta da citada anteriormente. Após eliminação do glicogênio por tratamento com amilase, as frações obtidas (Hm-TASFK e Hm-TAPFK, respectivamente) consistem, provavelmente, em -glucanas ramificadas contendo uma cadeia principal constituída por β-Glcp ligadas (16), as quais se apresentam parcialmente substituídas em O-3. Análises adicionais de caracterização estrutural (RMN 2D, metilação, degradação parcial de Smith, entre outras) deverão ser realizadas para confirmar a estrutura das -glucanas isoladas e das demais frações obtidas neste estudo. Com a finalidade de comprovar os efeitos dos polissacarídeos como modificadores de resposta biológica, as frações purificadas (fucomanogalactana e -glucanas) de H. marmoreus foram enviadas para avaliação da atividade, em colaboração com o Prof. Dr. Edvaldo da Silva Trindade e Dra. Stellee M. P. Biscaia do Departamento de Biologia Celular da Universidade Federal do Paraná. Resultados preliminares da fucomanogalactana (Hm-FMG) demonstraram que a heterogalactana não foi citotóxica, nem alterou a morfologia celular, mas foi capaz de reprogramar as células de melanoma murino B16-F10, modificando a capacidade de formação de colônias e a migração celular, sem alterar a proliferação celular. Diante dos promissores efeitos antimelanoma in vitro do polissacarídeo Hm-FMG, pode-se sugerir que estes polímeros são responsáveis por parte das propriedades terapêuticas conferidas por este macrofungo. Para comprovar estes achados, ensaios adicionais deverão ser realizados para comprovar a possível ação antitumoral das demais frações purificadas, bem como o mecanismo de ação destes compostos.