Desenvolvimento de um aptassensor para detecção do vírus da dengue

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dc.contributor.advisor-co1Andrade, Leonardo Santos
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/5360511377400279eng
dc.contributor.advisor1Neves, Adriana Freitas
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/2984939300978146eng
dc.contributor.referee1Neves, Adriana Freitas
dc.contributor.referee2Santos, Maria Rita de Cássia
dc.contributor.referee3Vieira, Pabline Marinho
dc.creatorSouza, Evellyn Gonçalves de
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/6087603527468653eng
dc.date.accessioned2017-09-19T13:57:54Z
dc.date.accessioned2022-04-26T13:42:43Z
dc.date.available2022-04-26T13:42:43Z
dc.date.issued2017-08-17
dc.description.abstractDengue is an endemic disease that causes wide concern both the health systems and to the patients. Thus, it is important that studies aiming at diagnoses faster and with possibility of field application can be developed for the medical intervention happens early, avoiding the worsening of the cases. Therefore, the aim of this work was to develop an electrochemical biosensor based on the use of aptamer as a bioelement for recognition on the surface of the boron doped diamond electrode (BDD) for the detection of each of the four serotypes of the dengue virus. Previously to the development of the biosensor, the dot-blot and apta-PCR techniques were used as validation methods for the interaction between aptamer B07 and target, the 5'UTR region present in the viral genome. The cyclic voltammetry technique was used in the analysis of redox reactions on the surface of the BDD electrode with and without modification of its surface with chitosan film. Ferrocene was used as the redox mediator and electroactive indicator of hybridization of the DNA strands formed in the sensor. The peaks of current indicated that the electrode with chitosan film modification on its surface presented greater stability. The redox compound had higher affinity for the double chains hybridized on the surface of the electrode, showing current values for DENV 1, 2, 3 and 4 of were 0.73; 0.69; 0.79 and 1.03 μA, respectively. These values were higher than the current found for the single-stranded aptamer (ssDNA), which was 0.62 μA, as well as for the current obtained from the aptamer hybridized with its complementary strand (dsDNA) whose value was 0.91 μA. Analyzes with time variations were performed showing a reduction in current values as a function of time, probably due to the reduction of the interaction of the electroactive material in the sensor. The aptasensor developed here showed good detection distinction between nucleic acid sequences, presenting potential for application in the detection of dengue virus.eng
dc.description.resumoA dengue é uma doença endêmica que causa grande preocupação tanto aos sistemas de saúde quanto aos pacientes. Dessa forma, é importante que estudos visando diagnósticos mais rápidos e com possibilidade de aplicação a campo possam ser desenvolvidos para que a intervenção médica possa ser precoce, evitando-se o agravamento dos casos. Neste sentido, buscou-se no presente trabalho desenvolver um biossensor eletroquímico baseado no uso de aptâmero como bioelemento reconhecedor na superfície do eletrodo de diamante dopado com boro (DDB) para a detecção de cada um dos quatro sorotipos do vírus da dengue. Previamente ao desenvolvimento do biossensor, as técnicas de dot-blot e apta-PCR foram utilizadas como métodos de validação da interação entre o aptâmero B07 e alvo, a região 5’UTR presente no genoma viral. A técnica de voltametria cíclica foi utilizada nas análises de reações redox na superfície do eletrodo DDB com e sem modificação de sua superfície com filme de quitosana. O composto ferroceno foi utilizado como mediador redox e indicador eletroativo de hibridização das cadeias de DNA formadas no sensor. Os picos de corrente indicaram que o eletrodo com modificação de filme de quitosana em sua superfície apresentou maior estabilidade, onde o composto redox teve maior afinidade pelas duplas cadeias hibridizadas na superfície do eletrodo, apresentando valores de correntes para DENV 1, 2, 3 e 4 de foram 0,73; 0,69; 0,79 e 1,03 μA, respectivamente. Esses valores foram superiores a corrente encontrada para o aptâmero em fita simples (ssDNA) que foi de 0,62 μA, assim como observada para corrente obtida do aptâmero hibridizado com sua fita complementar (dsDNA) cujo valor obtido foi de 0,91 μA. Análises com variações de tempo foram realizadas apresentando redução nos valores de correntes em função do tempo, provavelmente devido à redução da interação do material eletroativo no sensor. O aptasensor aqui desenvolvido apresentou boa detecção distinção entre sequências de ácidos nucleicos, apresentando potencial para aplicação na detecção do vírus da dengue.eng
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationSOUZA, Evellyn Gonçalves de. Desenvolvimento de um aptassensor para detecção do vírus da dengue. 2017. 56 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal de Goiás, Catalão, 2017.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufcat.edu.br/tede/handle/tede/7766
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentRegional Catalão (RC)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Química (RC)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectAptâmeropor
dc.subjectDenguepor
dc.subjectFerrocenopor
dc.subjectDetecção eletroquímicapor
dc.subjectVoltametria cíclicapor
dc.subjectQuitosanapor
dc.subjectAptamereng
dc.subjectFerroceneeng
dc.subjectElectrochemical detectioneng
dc.subjectCyclic voltammetryeng
dc.subjectChitosaneng
dc.subject.cnpqQUIMICA::QUIMICA ORGANICAeng
dc.titleDesenvolvimento de um aptassensor para detecção do vírus da dengueeng
dc.title.alternativeDevelopment an aptasensor for dengue virus detectioneng
dc.typeDissertaçãoeng

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